SHP-77 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞（STR鑒定）

簡介：

SHP-77 保留了SCLC的重要特征，具有穩(wěn)定的生物化學(xué)特性，可以連續(xù)培養(yǎng)。該細(xì)胞系是小細(xì)胞肺癌中一種不常見的未分化大細(xì)胞突變體。它雖然具有突變體的形態(tài)，但保持了經(jīng)典SCLC的生化特性。電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)存在腺體形成和胞漿內(nèi)板層體(intracytoplasmic lamellar bodies)。這些細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記物L(fēng)-多巴脫羧酶和致密核心分泌顆粒(dense core secretory granules)。

SHP-77可用做檢測51Cr和111In釋放對體外細(xì)胞及裸鼠體內(nèi)毒性的靶標(biāo)，用于評估肺癌患者的細(xì)胞和血清的免疫反應(yīng)水平。該細(xì)胞可用于評估接受放射或化學(xué)療法治療的SCLC患者的免疫狀況。經(jīng)本庫STR檢測無誤。

細(xì)胞特性：

1） 來源：54歲 男性 肺; 小細(xì)胞肺癌

2） 形態(tài)：懸浮和松散貼壁

3） 含量：>1x10^6  細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5） 用途：僅供科研使用。

運(yùn)輸和保存：

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

細(xì)胞接收后的注意事項：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完培6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完培來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基                87%

優(yōu)質(zhì)胎牛血清                                 10%

GlutaMAX-1谷氨/酰胺                              1%

Sodium Pyruvate丙酮酸鈉                       1%

P/S青霉/素-鏈霉/素                            1%
注意: 該細(xì)胞參考傳代周期：4-6天,參考換液頻率：每2-3天換1次液,傳代時可以輕輕拍打細(xì)胞培養(yǎng)瓶側(cè)面十余次，將懸浮的細(xì)胞進(jìn)行收集離心，以40萬~50萬/ mL的密度重懸傳代。輕輕拍打后顯微鏡下觀察仍貼壁未懸浮的細(xì)胞量多的話可以繼續(xù)拍打重復(fù)收集，細(xì)胞量很少的則丟棄，不收集傳代。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完培的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完培重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完培的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

SHP-77 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞（STR鑒定）

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